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談談LB培養基滅菌前后pH值差異的原因
  LB培養基是微生物試驗的基礎,直接影響微生物的試驗結果,而pH值又是培養基的重要監控項目。這是因為微生物的生長不僅依賴豐富的營養,還需要一個適宜的pH環境,只有在適宜的pH環境下微生物才能正常生長繁殖或體現其生物特性,因此培養基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗結果。在培養基配制過程中,滅菌過程對培養基pH值影響尤為重要。我們常常可以發現,培養基在滅菌前后pH值有差異,一般滅菌后pH值都會有所下降,這是為什么呢?本文我們將和大家簡單聊一下滅菌前后pH值變化的那些事。
 
  一、滅菌的時間和溫度:
 
  在高壓濕熱滅菌時,長時間的高溫會對培養基產生很多不利的影響,例如會導致營養物質分解、營養成分改變以及pH值變化,進而影響微生物生長。同時還可能引起培養基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝膠強度變化等。培養基在滅菌過程中,滅菌的溫度和時間,高壓滅菌器升溫、降溫的速率,滅菌容器的容積和裝載方式等因素都對培養基的滅菌有著重要影響。
 
  二、培養基的成分:
 
  在培養基的配制過程中我們會發現,同樣的滅菌溫度和時間,同樣的體積和裝量的不同培養基,在滅菌后pH值變化不同,有的培養基pH值變化較多,有的培養基pH值變化較少。這是因為不同培養基的成分不盡相同,而不同的成分在滅菌過程中對培養基ph值有著不同的影響。糖類和蛋白胨是培養基中最常見的兩種重要成分,那么這兩種成分分別對培養基滅菌后pH值有著什么樣的影響呢?
 
  糖類,例如葡萄糖、乳糖等作為碳源被微生物所利用。糖類在高溫條件下會產生有機酸使培養基pH值下降。一般情況下,培養基含糖量越高,滅菌后pH值下降越多。如果過度滅菌pH值變化會更加明顯。同時,糖類在高溫滅菌時容易焦化,使培養基顏色加深。
 
  蛋白胨一般作為培養基氮源,為微生物的生長提供營養物質。蛋白胨在培養基滅菌時還能對培養基的pH值變化起到一定的緩沖作用。一般含胨量高的培養基,滅菌前后pH值變化相對較小。
 
  另外,若培養基成分中含有緩沖劑,如磷酸氫二鉀等,也可以減少培養基滅菌前后pH值的變化。
 
  三、測量pH值時的溫度:
 
  同一培養基在不同溫度下測得的pH值也會有一定差異,一般培養基的pH值會隨著測量時溫度的升高而降低。培養基滅菌之后未完全冷卻時,測量的pH值一般會偏低,這是由于溫度升高時溶液中的游離離子數增多,測得的pH值較低;反之,當溫度降低時游離離子數減少,測得的pH值較高。通常我們在測定培養基pH值時,溫度控制在25℃左右。

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